蜂蜜分析測定 液相色譜儀

LC-20A高效液相色譜儀產品簡介

品名：液相色譜儀

型號：LC-20A

生產廠家：Shimadzu島津

當今，在各行各業中，生存競爭日趨激烈，法規介入、IT技術迅速普及等等，這大大改變了經營環境。在這種背景下，對于可應用于研究開發、品質管理、環境監測等眾多用途的高效液相色譜儀，客戶提出的要求和面臨的課題多種多樣。

為了快速地滿足多樣化的客戶需求，島津制作所投入整體力量開發了高效液相色譜儀--『Prominence』。充實基本性能的同時，確立了高度對應網絡要求的綜合管理系統，一元化管理數據與裝置，實現了分析的高效率。

島津Prominence將是網絡化HPLC的新標志

LC-20A高效液相色譜儀產品特點：

網絡化 ——為分析工作者提供*解決方案

高性能 ——輕松滿足客戶對儀器嚴格的要求

自動化 ——高效率高可靠性贏得客戶的信賴

LC-20A高效液相色譜儀技術參數：

系統控制器 Prominence CBM-20A/20Alite

>> CBM-20A

可連接的單元：輸液單元 多4臺、自動進樣器1臺、柱溫箱1臺、檢測器 多2臺、鎦分收集器1臺、輔助控制器 多2臺

連接單元數：8（可增12）

數據緩沖：約24小時之1分析（采樣率500ms時，只限LCsolution使用時）

>> CBM-20Alite

可連接的單元：輸液單元 多4臺、自動進樣器（SIL-10AF/10AP/10A除外）1臺、柱溫箱1臺、檢測器多2臺、輔助控制器 多2臺

連接單元數：5

數據緩沖：約24小時之1分析（采樣率500ms時，只限LCsolution使用時）

輸液單元 Prominence LC-20AD/20AT/20AB

>> LC-20AD

輸液方式：并聯雙柱塞

柱塞容量：10μL

大排液壓力：40MPa

流量設定范圍：0.0001mL/min-10.0000mL/min

流量準確度：1%或2μL /min其中較大值以內

流量精密度：0.06%RSD或0.02minSD，其中較大值以內

>> LC-20AT

輸液方式：串聯雙柱塞

柱塞容量：主泵頭47μL、副泵頭23μL

大排液壓力：40MPa

流量設定范圍：0.001mL/min-10.000mL/min

流量準確度：2%或2μL/min其中較大值以內

流量精密度：0.06%RSD或0.02minSD，其中較大值以內

>> LC-20AB

輸液方式：并聯雙柱塞（2式）

柱塞容量：10μL

大排液壓力：40MPa

流量設定范圍：0.0001mL/min-10.0000mL/min

流量準確度：1%或2μL /min其中較大值以內

流量精密度：0.06%RSD或0.02minSD，其中較大值以內

[輸液單元的梯度系統]

>> LC-20AB

　 梯度方式：高壓混合

　 混合溶劑數：2液

>> LC-20AD/20AT高壓GE規格

　 梯度方式：高壓混合

  混合溶劑數：2液或3液

>> LC-20AD/20AT低壓GE規格

  梯度方式：低壓混合

  混合溶劑數：多4液

紫外可見檢測器

>> Prominence SPD-20A/20AV UV-VIS檢測器

SPD-20A/SPD-20AV

光源：SPD-20A D2燈、SPD-20AV D2燈、W燈

波長范圍：SPD-20A 190nm-700nm 、SPD-20AV 190nm-900nm

波長準確度：1nm以下

波長精密度：0.1nm以下

噪聲：±0.25×10-U

漂移：±0.5×10-4AU/h

線性：>2.U

功能：190nm-370nm或371nm以上雙波長檢測，比例色譜圖輸出，波長掃描，時間程序

>> Prominence SPD-M20A PDA檢測器

SPD-M20A

光源：D2燈、W燈

二極管元件數：512

波長范圍：190nm-800nm

波長準確度：1nm以下

波長精密度：0.1nm以下

噪聲：±0.3×10-U

漂移：0.5×10-3AU/h

線性：>2.0AU

功能：等高線輸出，光譜檢索，大輸出

自動進樣器 Prominence SIL-20A/20AC

進樣方式：全量進樣，進樣量可變式

進樣量設定范圍：0.1μL－100μL（標準），1μL -2,000μL（選購件）

試樣處理數：

175（1mL試樣瓶）

105（1.5mL試樣瓶）SIL-20AC 70（1.5mL試樣瓶）

50（4mL試樣瓶）

192（96-孔MTP 2塊）

768（384-孔MTP 2塊）

在上述各規格外另可使用1.5mL試樣瓶10個

進樣量準確度：1%以下

進樣量精密度：0.2%RSD以下

交叉污染：典型值0.0025%以下（萘、洗必泰）

反復進樣次數：大30/1試樣

針清洗：在進樣前后任意設定

試樣冷卻器：SIL-20A 無 SIL-20AC 模塊冷卻加熱方式，兼除潮功能4℃-40℃

試樣架切換器

>> 試樣架切換器C

適用板：96孔MTP，96孔DWP，384孔MTP，384孔DWP，1.5mL樣品瓶（54個）

板處理塊數：12P

試樣冷卻器：模塊冷卻加熱方式，兼除潮功能 4℃-40℃

柱溫箱 Prominence CTO-20A/20AC

調溫方式：強制空氣循環式

冷卻方式：CTO-20A 無、CTO-20AC 電子冷卻式

溫度控制精密度：0.1℃以下（典型值0.04℃以下）

溫度控制范圍：CTO-20A （室溫+10）℃-85℃ 、CTO-20AC （室溫-10）℃-85℃

收容空間：W220×H365×D95mm

可收容儀器：手動進樣器2個，梯度混合器，高壓流路切換閥2個等

定時程序：線性溫度程序

安全措施：溶劑傳感器、溫度保險絲、上限溫度限制

蜂蜜是一種營養豐富的天然滋養食品，我國大部分地區都有生產。近年來，根據國家及一些省、市對蜂產品的監督抽查結果看，合格率非常低，僅在20%～45%之間。分析其原因有三：一是產品標準非常混亂，尤其是企業標準不規范；二是蜂農、花農未能科學使用藥物，致使蜂產品的農殘、藥殘超標；三是造假現象非常普遍。蜂蜜的“造假"方法比較多：在蜂蜜生產期間用白糖或者糖漿直接喂養蜜蜂；往蜂蜜里摻入大量大米糖漿、蔗糖、飴糖、甜蜜素等較低成本的糖類；往蜂蜜里加入防腐劑、澄清劑、增稠劑等添加劑；在同為真蜂蜜的情況下把價格低的摻入到價格高的當中以次充好；用白糖、明礬、醬油造假；更有惡劣的造假方法是使用硫酸裂解白糖，使雙糖成分變為單糖，從而冒充蜂蜜。假的蜂蜜則以蔗糖或工業麥芽糖、果脯為原料添加其它香精、增稠劑、著色劑為配方，是一種人造的甜蜜劑而已，其成分中沒有蜂蜜*的營養物質，對身體起不到應有的保健作用，其各種添加制劑和麥芽糖都是工業用品，過量攝入是有害健康的。如果是用明礬等添加劑勾兌，則明礬中的鋁離子對人體健康的危害非常大：明礬食用過量會影響其他必需礦物質元素的攝入，可能導致骨質疏松、貧血等一系列病癥的發生；引起老年癡呆；還可能會造成遺傳毒性，等嚴重危害。在蜂蜜檢測當中主要使用液相色譜儀進行檢測。

   為了對應2015版藥典——蜂蜜相關測定，賽暢儀器為您解析液相色譜法檢測蜂蜜中各種成分的方法所用儀器耗材?？梢詭椭鷱V大藥物分析者特別是各藥檢所中藥室、中藥企業解決在分析檢測蜂蜜中遇到的問題。

  2015 版《中國藥典》一部中規定了蜂蜜中寡糖、5-羥甲基糠醛、及營養成分果糖、葡萄糖的測定。對余這三項的測定說明如下：

一  寡糖的測定--目前市場出現的假蜂蜜中常添加大量糖漿，含有較多寡糖成分。通過檢測蜂蜜樣品是否出現寡糖，能快速鑒定摻假蜂蜜。藥典規定寡糖的測定采用薄層色譜法，前處理需要用一種特殊的固相萃取小柱，賽暢儀器現已可為客戶提供成品固相萃取小柱5010-SPE6252-AC SpecialSPE Column Oligosaccharides in honey，200mg 硅藻土/500mg 活性碳/200mg 硅藻土/6ml，30/p，*藥典要求。

二  5-羥甲基糠醛--羥甲基糠醛是衡量蜂蜜新鮮度的一項重要指標，其含量越少，表明蜂蜜越新鮮。蜂蜜貯存和加工過程中溫度越高，時間越長，產生的羥甲基糠醛就越多，它的含量高，標志蜂蜜貯存環境或加工工藝不合理，或者蜂蜜中有摻假。 5-羥甲基糠醛極性較大，適合用液相色譜柱

5020-89731 InertSustain AQ-C18 5um，4.6*250mm 分析。

三  果糖、葡萄糖—為蜂蜜中的營養成分。藥典中推薦使用Prevail Carbohyrate ES 色譜柱，此為聚合物基質氨基液相色譜柱

2015 版藥典中對以上三項規定的測定方法如下：

【檢查】

寡糖

取本品2g，置燒杯中，加入10ml 水溶解后，緩緩加至活性炭固相萃取柱（在固相萃取空柱管底部**一個篩板，壓緊，置固相萃取裝置上。稱取硅藻土0.2g，加水適量混勻，用吸管加至固相萃取柱管中，自然沉降形成3μm 厚的硅藻土層，打開真空泵吸引，稱取活性炭0.5g 加10ml 水攪拌，混勻，用吸管加入，在真空泵的吸引下使活性炭沉降，當水面接近活性炭層面時，再次注入0.2g 用水混勻的硅藻土（蜂蜜中寡糖測定固相萃取小柱：5010-SPE6252-ACSpecial SPE Column Oligosaccharides in honey，200mg 硅藻土/500mg 活性碳/200mg 硅藻土/6ml，30/p），在真空泵的吸引下，以1 秒/滴的速度用25ml的水預洗，當液面到達柱面上2μm 時關掉**，再壓入上篩板，備用）中，打開**，在真空泵的吸引下，使

溶液通過柱子，待液面下降到柱面以上2μm 時，用7%乙醇25ml 洗脫，棄去洗脫液。再用50%乙醇l0ml 洗脫，收集洗脫液，置65℃水浴中減壓濃縮至干，殘渣加30%乙醇1ml 使溶解，作為供試品溶液。另取麥芽五糖對照品，加30%乙醇制成每1ml 含1mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0512）試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各3ml，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以正丙醇-水-三乙胺（60：30：0.7）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液（取二苯胺1g，苯胺1ml，磷酸5ml，加丙醇至50ml，混勻），加熱至斑點顯色清晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品相應位置的下方，應不得顯斑點。

5-羥甲基糠醛 照液相色譜法（通則0512）測定。

色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（液相色譜柱：5020-89731 InertSustainAQ-C18 5um，4.6*250mm）；以乙腈-0.1%甲酸溶液（5：95）為流動相；5-羥甲基糠醛檢測波長為284nm，鳥苷檢測波長為254nm。理論板數按鳥苷峰計算應不低于3000。對照品溶液的制備 取鳥苷對照品適量，精密稱定，加10%甲醇制成每1ml 含鳥苷0.2mg 的溶液，即得。另取5-羥甲基糠醛對照品適量，加10%甲醇制成每1ml 含4μg 的溶液，作為定位用。供試品溶液的制備 取本品1g，置燒杯中，精密稱定，加10%甲醇適量溶解，并分次轉移至50ml 量瓶中，精密加入鳥苷對照品溶液1ml，加10%甲醇至刻度，搖勻，即得。測定法精密吸取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定；另取鳥苷對照品溶液，5-羥甲基糠醛對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，用以確定供試品色譜中5-羥甲基糠醛及鳥苷的色譜峰；以鳥苷對照品計算含量并乘以校正因子0.340 進行校正，即得。本品含5-羥甲基糠醛，不得過0.004%。蔗糖和麥芽糖照〔含量測定〕項下方法測定，分別計算含量。本品含蔗糖和麥芽糖分別不得過5.0%。

[果糖、葡萄糖含量測定】照液相色譜法（通則0512）測定。

色譜條件與系統適用性試驗 以Prevail Carbohyrate ES（聚合物基質液相色譜柱：SHO-F7630001 Asahipak NH2P-50 4E 250MMx4.6MM）為色譜柱，以乙腈-水（75：25）為流動相；示差折光檢測器檢測。理論板數按果糖峰計算應不低于2000。標準曲線的制備 分別精密稱取果糖對照品1.0g，葡萄糖對照品0.8g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，作為果糖、葡萄糖對照品儲備液。另精密稱取蔗糖對照品0.2g，麥芽糖對照品0.2g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，搖勻，作為蔗糖、麥芽糖對照品儲備液。分別精密量取果糖、葡萄糖對照品儲備液和蔗糖、麥芽糖對照品儲備液，加40%乙腈配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖混合對照品溶液。每一濃度溶液配制中，儲備液的用量和稀釋體積見2015 版藥典P360。精密吸取混合對照品溶液各15μl，注入液相色譜儀，分別測定。以對照品濃度為橫坐標，以峰面積值為縱

坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。供試品溶液的制備 取本品約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法 精密量取供試品溶液15μl，注入液相色譜儀，測定，按標準曲線法計算含量。

本品含果糖（C6H12O6）和葡萄糖（C6H12O6）的總量不得少于60.0%，果糖與葡萄糖含量比值不得小于1.0。